Preconditioning with L-alanyl-glutamine reduces hepatic ischemia-reperfusion injury in rats / Pré-condicionamento com L-alanil-glutamina reduz a lesão de isquemia-reperfusão no fígado de ratos

PURPOSE: To evaluate the effects of pre-conditioning with L-alanyl- glutamine (L-Ala-Gln) in rats subjected to total hepatic ischemia. METHODS: Thirty Wistar rats, average weight 300g, were randomly assigned to 3 groups (n=10): G-1 - Saline, G-2- L-Ala-Gln, G-3-control (Sham). G-1 and G-3 groups were treated with saline 2.0 ml or L-Ala-Gln (0.75mg/Kg) intraperitoneally (ip) respectively, 2 hours before laparotomy. Anesthetized rats were subjected to laparotomy and total hepatic ischemia (30 minutes) induced by by clamping of portal triad. Control group underwent peritoneal puncture, two hours before the sham operation (laparotomy only). At the end of ischemia (G1 and G2), the liver was reperfused for 60 minutes. Following reperfusion blood samples were collected for evaluation of alanine aminotransferase (ALT) and lactate dehydrogenase (LDH) levels. Liver (medium lobe) was removed for immunohistochemistry study with antibody for Caspase-3. RESULTS: It was found a significant decrease (p<0.05) of ALT levels (270.6 +40.8 vs 83.3 +5.5 - p <0.05), LDH (2079.0 +262.4 vs. 206.6 +16.2 - p <0.05) and Caspase-3 expression (6.72 +1.35 vs. 2.19 +1.14, p <0.05) in rats subjected to I / R, comparing the group treated with L-Ala -Gln with G-2. Also, the ALT level was significantly lower (P<0.05) in G-1 and G-2 groups than in G-3 (control group). CONCLUSION: L-Ala-Gln preconditioning in rats submitted to hepatic I/R significantly reduces ALT, LDH and Caspase-3 expression, suggesting hepatic protection.

OBJETIVO: Avaliar os efeitos do pré-condicionamento com L-alanil-glutamina (L-Ala-Gln) em ratos submetidos à isquemia hepática total. MÉTODOS: Trinta ratos Wistar, peso médio 300g foram divididos aleatoriamente em três grupos (n = 10): G-1 - Saline, G-2: L-Ala-Gln, G-3: controle. G-1 e G-3 grupos foram tratados com 2,0 ml de solução salina ou L-Ala-Gln (0,75 mg / kg) intraperitoneal (ip), respectivamente, duas horas antes da laparotomia. Ratos anestesiados foram submetidos à laparotomia e isquemia hepática total (30 minutos) induzida por pinçamento da tríade portal. O grupo controle foi submetido à punção peritoneal, duas horas antes da operação simulada (apenas laparotomia). No final da isquemia, o fígado foi reperfundido por 60 minutos. As amostras de sangue foram colhidas ao término da reperfusão para determinação das concentrações alanina aminotransferase (ALT) e desidrogenase láctica (LDH). O lobo médio do fígado foi removido para estudo imuno-histoquímico com anticorpo para caspase-3. RESULTADOS: Houve diminuição significante (p<0.05) dos valores de ALT (270,6+40,8 vs 83,3+5,5 - p<0,05), LDH (2079,0+262,4 vs 206,6+16,2 - p<0,05) e expressão da Caspase-3 (6,72+1,35 vs 2,19+1,14 -p<0,05) nos ratos submetidos à I/R, comparando o grupo tratado com L-Ala-Gln, ao grupo salina. Além disso, o nível de ALT foi significativamente menor (P <0,05) no G-1 e G-2 do que no grupo G-3 (grupo controle). CONCLUSÃO: O pré-condicionamento com L-Ala-Gln em ratos submetidos a I/R hepática reduz significativamente as concentrações de ALT e LDH e a expressão da caspase-3, sugerindo proteção hepática.

Acute pulmonary injury induced by experimental muscle trauma / Lesão pulmonar aguda induzida por trauma muscular experimental

PURPOSE: To develop an easily reproducible model of acute lung injury due to experimental muscle trauma in healthy rats. METHODS: Eighteen adult Wistar rats were randomized in 3 groups (n=6): G-1- control, G-2 - saline+trauma and G-3 - dexamethasone+trauma. Groups G-1 and G-2 were treated with saline 2,0ml i.p; G-3 rats were treated with dexamethasone (DE) (2 mg/kg body weight i.p.). Saline and DE were applied 2h before trauma and 12h later. Trauma was induced in G-2 and G-3 anesthetized (tribromoethanol 97 percent 100 ml/kg i.p.) rats by sharp section of anterior thigh muscles just above the knee, preserving major vessels and nerves. Tissue samples (lung) were collected for myeloperoxidase (MPO) assay and histopathological evaluation. RESULTS: Twenty-four hours after muscle injury there was a significant increase in lung neutrophil infiltration, myeloperoxidase activity and edema, all reversed by dexamethasone in G-3. CONCLUSION: Trauma by severance of thigh muscles in healthy rats is a simple and efficient model to induce distant lung lesions.

OBJETIVO: Desenvolver um modelo facilmente reprodutível de lesão pulmonar aguda decorrente de trauma muscular experimental em ratos sadios. MÉTODOS: Dezoito ratos Wistar adultos foram randomizados em 3 grupos (n=6): G-1-controle, G-2 - trauma+salina e G-3 - trauma+dexametasona. Grupos G-1 e G-2 foram tratados com salina 2,0 ml ip, G-3 ratos foram tratados com dexametasona (DE) (2 mg/kg peso corporal ip). Salina e DE foram aplicadas 2h antes e 12h depois do trauma. Trauma foi induzido em ratos G-2 e G-3 anestesiados (tribromoetanol 97 por cento de 100 ml/kg, i.p.) por secção da musculatura anterior da coxa logo acima da articulação do joelho, preservando os grandes vasos e nervos. Amostras de tecido (pulmão) foram coletadas para avaliação da mieloperoxidase (MPO), e exames histopatológicos. RESULTADOS: Vinte e quatro horas após a indução da lesão muscular houve um aumento significativo na infiltração de neutrófilos pulmonares, atividade da mieloperoxidase e edema, todos revertidos por dexametasona, no G-3. CONCLUSÃO: O trauma decorrente da secção dos músculos da coxa em ratos saudáveis é um modelo simples e eficaz para induzir lesões pulmonares à distância.